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導(dǎo)讀

    生物發(fā)酵飼料作為實(shí)現(xiàn)無(wú)抗飼養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)之一，近年來(lái)在我國(guó)養(yǎng)殖行業(yè)和飼料工業(yè)得到了迅速發(fā)展。為研究發(fā)酵全價(jià)飼料（FCF）在生長(zhǎng)豬上的應(yīng)用效果，作者前期開(kāi)展了為期１個(gè)月（短期）的發(fā)酵全價(jià)飼料應(yīng)用試驗(yàn)，結(jié)果表明，短期內(nèi)100％飼喂發(fā)酵全價(jià)飼料可以提高生長(zhǎng)豬的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和飼料轉(zhuǎn)化率，降低死淘率及糞便臭味物質(zhì)含量，具有很好的抗生素替代效果。但是長(zhǎng)期100％飼喂是否仍具有顯著優(yōu)勢(shì)，是否會(huì)產(chǎn)生健康風(fēng)險(xiǎn)，尚未可知。目前關(guān)于發(fā)酵全價(jià)飼料的研究多采用部分添加的飼喂模式，喬艷明等用發(fā)酵飼料替代5％的育肥豬日糧，試驗(yàn)期16周，結(jié)果表明豬的生產(chǎn)性能提高，發(fā)病率降低；何如芳在斷奶仔豬日糧中添加30％的發(fā)酵全價(jià)飼料，飼喂28ｄ，結(jié)果表明發(fā)酵全價(jià)飼料可以提高斷奶仔豬的生產(chǎn)性能，改善腸道健康，提高斷奶仔豬的抗病力；胡新旭等研究表明，日糧中含有20％的固態(tài)發(fā)酵全價(jià)飼料（試驗(yàn)期154ｄ）可提高生長(zhǎng)育肥豬的生產(chǎn)性能，增強(qiáng)免疫力，改善肉品質(zhì)，實(shí)現(xiàn)無(wú)抗飼養(yǎng)。而關(guān)于生長(zhǎng)豬長(zhǎng)期100％飼喂發(fā)酵全價(jià)飼料的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究在前期試驗(yàn)基礎(chǔ)上，延長(zhǎng)試驗(yàn)周期，通過(guò)對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能、糞便臭味物質(zhì)、血清抗氧化性能及免疫性能指標(biāo)的測(cè)定，揭示長(zhǎng)期100％飼喂發(fā)酵全價(jià)飼料對(duì)生長(zhǎng)豬健康的影響，為發(fā)酵全價(jià)飼料的科學(xué)應(yīng)用提供參考。

１.１ 試驗(yàn)動(dòng)物及分組

    試驗(yàn)在重慶市榮昌區(qū)重慶市畜牧科學(xué)院動(dòng)物試驗(yàn)豬場(chǎng)進(jìn)行。選擇90頭22ｋｇ左右的健康二元雜交豬（約克夏×榮昌豬），公母各半，隨機(jī)分成３組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5頭豬，進(jìn)行7ｄ預(yù)飼，隨后對(duì)照組飼喂無(wú)抗基礎(chǔ)日糧，抗生素組飼喂含0.04％桿菌肽鋅（有效含量為10％）的基礎(chǔ)日糧，發(fā)酵組飼喂經(jīng)發(fā)酵處理后的基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)期60ｄ。試驗(yàn)期間，豬自由采食和飲水，按豬場(chǎng)常規(guī)程序消毒免疫。

１.２ 日糧組成及養(yǎng)分含量

   基礎(chǔ)日糧的配制參照《中國(guó)豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)2004》肉脂型生長(zhǎng)豬營(yíng)養(yǎng)需要量。各組日糧原料組成及日糧營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表１。發(fā)酵飼料制作方法及飼料發(fā)酵前后養(yǎng)分含量的測(cè)定均參照劉志云等方法。

１.３ 樣品采集與指標(biāo)測(cè)定

     試驗(yàn)期間，每天記錄豬的采食量。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)空腹稱重，記錄豬末重，計(jì)算ADG、ADFI及料重比（F／G）；采集豬新鮮排泄的糞便樣品，分裝于50ｍＬ離心管，置于冰盒中，運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室后測(cè)定吲哚、3－甲基吲哚、對(duì)甲酚及揮發(fā)性脂肪酸（VFA）的含量；試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天上午08∶00，每組選取6頭豬，頸靜脈采血8～10ｍＬ，分裝于促凝管中，4℃、3000ｒ／min離心10min，分離血清，用于測(cè)定血清抗氧化指標(biāo)和免疫指標(biāo)。飼料發(fā)酵前后還原力、羥自由基清除力、DPPH自由基清除率的測(cè)定參考Yang等方法；總抗氧化力的測(cè)定采用FRAP法；糞便中對(duì)甲酚、吲哚、3-甲基吲哚含量的測(cè)定參考宋凡方法；VFA的測(cè)定參照龍黎明等方法；血清總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）采用分光光度法進(jìn)行測(cè)定，血清免疫球蛋白Ｇ（IgG）、免疫球蛋白Ｍ（IgM）、補(bǔ)體３（C3）、補(bǔ)體４（C4）使用ELISA法測(cè)定，試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

１.４ 數(shù)據(jù)處理

    數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用SPSS 19.0對(duì)飼料的抗氧化性能進(jìn)行獨(dú)立樣本ｔ檢驗(yàn)，對(duì)豬生長(zhǎng)性能、血清抗氧化指標(biāo)、免疫指標(biāo)和糞便臭味物質(zhì)進(jìn)行單因素方差分析，組間差異使用Duncan氏多重比較進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，以Ｐ＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

２.１ 發(fā)酵前后全價(jià)飼料氧化還原特性的變化

     由表２可知，飼料經(jīng)發(fā)酵處理后，總抗氧化能力極顯著提高（Ｐ＜０.０１），還原力和羥自由基清除力有升高趨勢(shì)，但差異不顯著（Ｐ＞0.05），DPPH 自由基清除率無(wú)顯著變化（Ｐ＞0.05）。

３.１ 發(fā)酵全價(jià)飼料對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能和糞便臭味物質(zhì)的影響

     作者前期研究結(jié)果表明，飼喂1個(gè)月發(fā)酵全價(jià)飼料可以明顯提高生長(zhǎng)豬ADFI、ADG，降低生長(zhǎng)豬F／G和死淘率，降低糞便臭味物質(zhì)含量，具有很好的抗生素替代效果。本研究在前期飼喂30ｄ的基礎(chǔ)上又持續(xù)進(jìn)行了１個(gè)月的飼喂試驗(yàn)，結(jié)果顯示，在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，發(fā)酵組豬第１個(gè)月所表現(xiàn)出的促生長(zhǎng)、降低糞便臭味物質(zhì)、替代抗生素方面的優(yōu)勢(shì)都消失了。

    發(fā)酵全價(jià)飼料在生長(zhǎng)豬上的長(zhǎng)期效應(yīng)消失，分析其原因，一方面是由于試驗(yàn)所用的發(fā)酵飼料有機(jī)酸含量較高，pH在４.０～４.５之間，其中乳酸含量為421.67mmol／ｋｇ，長(zhǎng)期飼喂對(duì)消化系統(tǒng)已發(fā)育完善的生長(zhǎng)豬可能存在健康風(fēng)險(xiǎn)。Missotten等、Brooks報(bào)道指出，發(fā)酵飼料中乳酸等有機(jī)酸含量過(guò)多，長(zhǎng)期飼喂會(huì)引起豬生長(zhǎng)受阻與胃腸道疾病（腸壁變薄、易斷等，進(jìn)而引起胃潰瘍、胃扭轉(zhuǎn)等）。作者在本試驗(yàn)完成后持續(xù)觀察，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵組個(gè)別豬出現(xiàn)吐血現(xiàn)象，解剖發(fā)現(xiàn)豬胃部出現(xiàn)潰瘍，腸道組織切片顯示，豬十二指腸、空腸、結(jié)腸黏膜完整性受損，絨毛排列疏松無(wú)序，表明長(zhǎng)期100０％飼喂發(fā)酵全價(jià)飼料確實(shí)引起了豬胃腸道結(jié)構(gòu)性損傷，影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化代謝，進(jìn)而引起動(dòng)物生長(zhǎng)受阻和糞便物質(zhì)改變。另一方面，長(zhǎng)期飼喂含高劑量活性益生菌的飼料，可能引發(fā)豬腸道菌群結(jié)構(gòu)變化，包括菌群多樣性降低、菌群的過(guò)度增長(zhǎng)等，進(jìn)而引起乳酸中毒、膽鹽吸收障礙等代謝紊亂問(wèn)題。Ｈｅ等研究表明，斷奶仔豬（試驗(yàn)周期25ｄ）自由采食枯草芽孢桿菌發(fā)酵飼料會(huì)改變其腸道菌群結(jié)構(gòu)，擾亂乳酸、乳清酸和非結(jié)合性膽汁酸的正常產(chǎn)生，提高循環(huán)系統(tǒng)中白介素－６的水平，增加腹瀉發(fā)生率。本研究所用發(fā)酵全價(jià)飼料中乳酸菌活性為9.67lg CFU/ｇ，連續(xù)飼喂２個(gè)月，可能會(huì)引起豬腸道菌群結(jié)構(gòu)失衡。但本研究未對(duì)豬腸道菌群結(jié)構(gòu)多樣性及菌群代謝產(chǎn)物進(jìn)行分析，因此暫不能判定其是否為長(zhǎng)期效應(yīng)消失的因素之一，后續(xù)研究中將會(huì)進(jìn)一步探索。

    另外，發(fā)酵全價(jià)飼料在儲(chǔ)存和飼喂的過(guò)程中還存在沉降問(wèn)題。Missotten等研究表明，發(fā)酵液態(tài)飼料存在較為嚴(yán)重的固體顆粒物沉降問(wèn)題，未經(jīng)有效控制，會(huì)使仔豬生長(zhǎng)受阻，同時(shí)伴隨腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)損傷。本試驗(yàn)所用的固態(tài)發(fā)酵飼料的水分含量約為50％，存放過(guò)程中也存在礦物質(zhì)及固態(tài)顆粒物的沉降問(wèn)題，推測(cè)是豬生長(zhǎng)受阻、糞便物質(zhì)變化的另一可能因素。

３.２ 發(fā)酵全價(jià)飼料對(duì)生長(zhǎng)豬血清抗氧化和免疫性能指標(biāo)的影響

    Gilbert等研究表明，微生物降解作用產(chǎn)生的小肽類物質(zhì)可以提高飼料的抗氧化功能。王雨瓊等認(rèn)為飼料的抗氧化性能在一定程度上反映出發(fā)酵飼料的品質(zhì)。Sharma等研究發(fā)現(xiàn)，飼料中的抗氧化物質(zhì)可以維持動(dòng)物機(jī)體的抗氧化防御機(jī)制，抵御自由基產(chǎn)生的氧化損傷，對(duì)動(dòng)物的健康和免疫系統(tǒng)至關(guān)重要。本試驗(yàn)結(jié)果也說(shuō)明固態(tài)發(fā)酵技術(shù)在提高飼料氧化還原性能方面具有積極作用，經(jīng)檢測(cè)，飼料發(fā)酵后的總抗氧化能力極顯著提高，還原力和羥自由基清除力有升高趨勢(shì)。然而，這種積極作用并未在長(zhǎng)期飼喂后體現(xiàn)在動(dòng)物的血清抗氧化指標(biāo)上。

    本試驗(yàn)中，飼喂發(fā)酵全價(jià)飼料的豬血清免疫指標(biāo)IgM和C4水平有所提高，這與前人的研究結(jié)果相符。Wang等報(bào)道發(fā)酵飼料中的益生菌代謝產(chǎn)物（如有機(jī)酸、酶、SCFAs、神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)等）在動(dòng)物機(jī)體免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。何如芳對(duì)斷奶仔豬飼喂30％的發(fā)酵飼料（試驗(yàn)期28ｄ）發(fā)現(xiàn)，仔豬血清總蛋白和IgM水平提高。Sanchez等認(rèn)為飼喂活性益生菌能夠影響動(dòng)物機(jī)體免疫系統(tǒng)，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。